.: ORİJİNAL ARAŞTIRMA
The Effect of Ascorbic Acid on Proliferation of Vascular Smooth Muscle Cells and Intimal Hyperplasia
Askorbik Asidin Anastomoz Sonrası Gelişen Vasküler Düz Kas Hücre Proliferasyonu ve İntimal Hiperplazi Üzerine Etkisi: Tavşan Modeli
Turkiye Klinikleri J Med Sci. 2013;33(1):126-31
doi: 10.5336/medsci.2012-29406
Makale Dili: EN
Tam Metin
ABSTRACT
Objective: Proliferation of smooth muscle cells leading to intimal hyperplasia developing at vascular intervention sites plays a major role in the development of restenosis. Ascorbic acid is a potent anti-oxidant with antiproliferative properties. The aim of this study was to investigate such effect of ascorbic acid on intimal hyperplasia. Material and Methods: Twenty-one male white New Zealand rabbits weighing 2-3 kg were selected. The animals were allocated to three groups each consisting of seven rabbits. Group 1 was the sham group. Group 2 was the control group and Group 3 consisted of rabbits receiving ascorbic acid. The right carotid arteries of the subjects in Groups 2 and 3 were transected and re-anastomosed. A daily dose of 100 mg ascorbic acid per kg body weight was administered intraperitoneally for 14 days to rabbits in Group 3. Rabbits in Group 2 were not subject to any pharmaceutical agent. All the subjects were sacrificed at the end of postoperative day 28. Their right carotid arteries were resected and were subject to histopathologic examination for smooth muscle cell proliferation and intimal hyperplasia. The arterial segments were fixed in 10% buffered formalin solution until the time of histological analysis. Each vessel was sectioned serially in 2-mm increments from the prepared paraffin blocks. Sections of 5 µm thickness were stained with hematoxylin and eosin (H&E) and Masson Trichrome. The diameters of vessels and their luminal areas, and the areas of tunica intima and tunica media were measured with 10X magnification. The thicknesses of tunica intima and tunica media were measured with 20X magnification. The morphometric measurements were then compared between groups. Results: Intimal thickness and intimal area were significantly lower in Group 1 when compared with the other groups (p=0.004, p=0.003). In Group 3, the ratios of tunica intima thickness/tunica media thickness and area of tunica intima/area of tunica media were significantly lower than those of Group 2 (p=0.015, p=0.046). Conclusion: Ascorbic acid reduces the intimal hyperplasia developing after vascular anastomoses.
Keywords: Ascorbic acid; muscle, smooth; hyperplasia
Objective: Proliferation of smooth muscle cells leading to intimal hyperplasia developing at vascular intervention sites plays a major role in the development of restenosis. Ascorbic acid is a potent anti-oxidant with antiproliferative properties. The aim of this study was to investigate such effect of ascorbic acid on intimal hyperplasia. Material and Methods: Twenty-one male white New Zealand rabbits weighing 2-3 kg were selected. The animals were allocated to three groups each consisting of seven rabbits. Group 1 was the sham group. Group 2 was the control group and Group 3 consisted of rabbits receiving ascorbic acid. The right carotid arteries of the subjects in Groups 2 and 3 were transected and re-anastomosed. A daily dose of 100 mg ascorbic acid per kg body weight was administered intraperitoneally for 14 days to rabbits in Group 3. Rabbits in Group 2 were not subject to any pharmaceutical agent. All the subjects were sacrificed at the end of postoperative day 28. Their right carotid arteries were resected and were subject to histopathologic examination for smooth muscle cell proliferation and intimal hyperplasia. The arterial segments were fixed in 10% buffered formalin solution until the time of histological analysis. Each vessel was sectioned serially in 2-mm increments from the prepared paraffin blocks. Sections of 5 µm thickness were stained with hematoxylin and eosin (H&E) and Masson Trichrome. The diameters of vessels and their luminal areas, and the areas of tunica intima and tunica media were measured with 10X magnification. The thicknesses of tunica intima and tunica media were measured with 20X magnification. The morphometric measurements were then compared between groups. Results: Intimal thickness and intimal area were significantly lower in Group 1 when compared with the other groups (p=0.004, p=0.003). In Group 3, the ratios of tunica intima thickness/tunica media thickness and area of tunica intima/area of tunica media were significantly lower than those of Group 2 (p=0.015, p=0.046). Conclusion: Ascorbic acid reduces the intimal hyperplasia developing after vascular anastomoses.
Keywords: Ascorbic acid; muscle, smooth; hyperplasia
ÖZET
Amaç: Düz kas hücre proliferasyonu ve bunun ardından gelişen intimal hiperplazi, vasküler girişimden sonra meydana gelen restenozda önemli rol alır. Askorbik asit antiproliferatif özelliği olan güçlü bir antioksidandır. Bu çalışmanın amacı, askorbik asidin bu etkilerinden yola çıkarak intimal hiperplazi üzerindeki etkisini incelemektir. Gereç ve Yöntemler: Rastgele seçilen 21 adet ortalama 2-3 kg ağırlığında Yeni Zelanda tipi erkek tavşan, her birinde 7 tavşan bulunan 3 gruba ayrıldı. Birinci gruba (Grup 1) hiçbir girişim yapılmadı. İkinci gruba (Grup 2) anastomoz yapıldı, ancak hiçbir ilaç verilmedi. Üçüncü gruba (Gup 3) ise anstomoz yapılıp askorbik asit verildi. Grup 2 ve Grup 3'deki deneklerin sağ karotis arterleri transekte edilip tekrar anastomoz edildikten sonra Grup 3'deki deneklere 14 gün süreyle her gün 100 mg/kg/gün dozunda intraperitoneal yoldan askorbik asit yapıldı. Grup 2'ye ise herhangi bir ilaç verilmedi. Tüm denekler 28.gün sonunda öldürüldü; sağ karotis arterleri çıkartıldıktan sonra düz kas hücre proliferasyonu ve intimal hiperplazi açısından histopatolojik olarak incelendi. Arter segmentleri %10'luk tamponlanmış formalin solüsyonu içerisinde histolojik incelemeye kadar bekletilerek fikse edildi. Hazırlanan parafin bloklardan her damar ardışık 2'şer mm'lik arayla kesitler halinde dilimlendi ve 5 µm kalınlığındaki kesitler hematoksilen-eozin (H&E) ve Masson Trikrom ile boyandı. Damar çapları, lümen alanları, intima ve media tabakalarının alanları 10X büyütmeli objektif ile ölçüldü. İntima ve media tabakalarının kalınlıkları da 20X büyütmeli objektif ile ölçüldü. Ardından morfometrik ölçümler gruplar arasında karşılaştırıldı. Bulgular: Grup 1'in intima kalınlıkları ve intima alanları diğer gruplara göre istatistiksel açıdan anlamlı ölçüde daha düşük bulundu (p=0,004, p=0,003). Grup 3'deki deneklerin tunica intima kalınlığı/tunica media kalınlığı ve tunica intima alanı/tunica media alanı oranları Grup 2'ye göre anlamlı düzeyde daha düşük bulundu (p=0,015, p=0,046). Sonuç: Askorbik asit, vasküler anastomozlardan sonra gelişen intimal hiperplazinin azaltılmasında etkilidir.
Anahtar Kelimeler: Askorbik asit; düz kas; hiperplazi
Amaç: Düz kas hücre proliferasyonu ve bunun ardından gelişen intimal hiperplazi, vasküler girişimden sonra meydana gelen restenozda önemli rol alır. Askorbik asit antiproliferatif özelliği olan güçlü bir antioksidandır. Bu çalışmanın amacı, askorbik asidin bu etkilerinden yola çıkarak intimal hiperplazi üzerindeki etkisini incelemektir. Gereç ve Yöntemler: Rastgele seçilen 21 adet ortalama 2-3 kg ağırlığında Yeni Zelanda tipi erkek tavşan, her birinde 7 tavşan bulunan 3 gruba ayrıldı. Birinci gruba (Grup 1) hiçbir girişim yapılmadı. İkinci gruba (Grup 2) anastomoz yapıldı, ancak hiçbir ilaç verilmedi. Üçüncü gruba (Gup 3) ise anstomoz yapılıp askorbik asit verildi. Grup 2 ve Grup 3'deki deneklerin sağ karotis arterleri transekte edilip tekrar anastomoz edildikten sonra Grup 3'deki deneklere 14 gün süreyle her gün 100 mg/kg/gün dozunda intraperitoneal yoldan askorbik asit yapıldı. Grup 2'ye ise herhangi bir ilaç verilmedi. Tüm denekler 28.gün sonunda öldürüldü; sağ karotis arterleri çıkartıldıktan sonra düz kas hücre proliferasyonu ve intimal hiperplazi açısından histopatolojik olarak incelendi. Arter segmentleri %10'luk tamponlanmış formalin solüsyonu içerisinde histolojik incelemeye kadar bekletilerek fikse edildi. Hazırlanan parafin bloklardan her damar ardışık 2'şer mm'lik arayla kesitler halinde dilimlendi ve 5 µm kalınlığındaki kesitler hematoksilen-eozin (H&E) ve Masson Trikrom ile boyandı. Damar çapları, lümen alanları, intima ve media tabakalarının alanları 10X büyütmeli objektif ile ölçüldü. İntima ve media tabakalarının kalınlıkları da 20X büyütmeli objektif ile ölçüldü. Ardından morfometrik ölçümler gruplar arasında karşılaştırıldı. Bulgular: Grup 1'in intima kalınlıkları ve intima alanları diğer gruplara göre istatistiksel açıdan anlamlı ölçüde daha düşük bulundu (p=0,004, p=0,003). Grup 3'deki deneklerin tunica intima kalınlığı/tunica media kalınlığı ve tunica intima alanı/tunica media alanı oranları Grup 2'ye göre anlamlı düzeyde daha düşük bulundu (p=0,015, p=0,046). Sonuç: Askorbik asit, vasküler anastomozlardan sonra gelişen intimal hiperplazinin azaltılmasında etkilidir.
Anahtar Kelimeler: Askorbik asit; düz kas; hiperplazi
.: İşlem Listesi