Barsak Amebiyazisli ÇocuklardaSerolojik Yöntemlerin Tanısal Değeri
THE DIAGNOSTICAL VALUE OF SEROLOGICAL TESTS IN CHILDREN WITHINTESTINAL AMOEBIASIS
Turkiye Klinikleri J Pediatr. 2001;10(4):190-6
Article Language: TR
Full Text
ÖZET
Amaç: Bölgemizdeki çocuklarda barsak amebiyazisinin seroprevalansını ve tanısında serolojik yöntemlerin kullanılabilirliği araştırmak. Materyal-Metod: Bu çalışmada; ortalama yaşları 73±54.1 ay olan klinikte akut barsak amebiyazisi düşünülüp, dışkı örneklerinde Entamoeba histolytica(E. histolytica) kisti ve/veya trofozoiti saptanan 76 amebik gastroenteritli ve dışkı incelemelerinde E. histolytica ve diğer parazitlere rastlanmayan 29 non-parazitik gastroenteritli hastalardan alınan toplam 105 serum örneği ile kontrol grubu olarak seçilen 35 sağlıklı çocuğun serum örneğinde ELISA yöntemiyle E.histolyticaya karşı oluşan IgG sınıfı antikoru arandı. Ayrıca, direkt serum fizyolojik (SF) yöntemiyle yapılan dışkı mikroskobisine göre amebik gastroenterit tanısı konan 76 çocuk hastadan 42sinde ve sağlıklı grubu oluşturan 35 çocuktan 10unda IFA yöntemiyle anti-amebik IgM antikor varlığı incelendi. Bulgular: Dışkısında E.histolytica kisti ve/veya trofozoiti saptanan 76 hasta çocuğun 11inde (%14.4), ELISA yöntemiyle anti-amebik IgG antikoru pozitif bulunurken, non-parazitik gastroenteritli 29 hasta çocuğun tümü seronegatifdi. Kontrol grubunda ise 35 çocuktan birinde (%2.8) amip IgG antikoru seropozitif bulundu. Serum örneklerinin IFA ile incelenmesi sonucunda dışkı mikroskobisine göre amebik gastroenterit tanısı konan 42 hasta çocuğun 22sinde (%52.3), 10 sağlıklı çocuğun ise üçünde (%30) 1/8 sulandırımda amip IgM antikoru seropozitif saptandı. Çalışmaya alınan ve dışkı mikroskobisine göre amebik gastroenterit tanısı konulan olguların ELISA yöntemiyle anti-amebik IgG ortalama absorbans değerleri non-parazitik gastroenteritli ve sağlıklı grubun ortalama amip IgG absorbans değerlerinden daha yüksek olmak üzere sırasıyla 0.49±0.23, 0.28±0.23, 0.27±0.41 olup aradaki fark istatistiksel olarak anlamlıydı (p<0.05). Buna karşın, IFA yöntemiyle anti-amebik IgM antikor pozitifliği bakımından dışkı mikroskobisine göre amebik gastroenterit tanısı konulan grup ile kontrol grubu arasında anlamlı bir istatistiksel fark bulunamadı (p>0.05). Çalışmada, direkt SF yöntemiyle karşılaştırıldığında amip ELISA IgG testinin duyarlılığı %14.4, özgüllüğü %98.4, amip IFA IgM testinin duyarlılığı %52.3, özgüllüğü %71.4 olarak belirlendi. Sonuç: Klinik olarak barsak amebiyazisi düşünülen hastalardan alınan dışkı örneklerinin kolay, hızlı ve ucuz bir yöntem olan direkt SF yöntemi ile incelenmesinin yanında iyi bir şekilde standardize edilerek hazırlanan serolojik kitlerin kullanılmasının tanıyı destekleyebileceği düşünülmüştür. Ayrıca son zamanlarda geliştirilen patojenik amip suşlarına karşı hazırlanmış monoklonal antikorların kullanıldığı dışkıda direkt antijen arayan yöntemlerle oldukça duyarlı olan, patojen ve patojen olmayan türler arasında ayrım yapmayı sağlayabilen PCR gibi moleküler testlerin tanıda kullanılmasının yararlı olacağı kanısına varıldı.
Anahtar Kelimeler: Amebiyazis, Entamoeba histolytica, ELISA-IgG, IFA-IgM, Seroloji, Tanı
Amaç: Bölgemizdeki çocuklarda barsak amebiyazisinin seroprevalansını ve tanısında serolojik yöntemlerin kullanılabilirliği araştırmak. Materyal-Metod: Bu çalışmada; ortalama yaşları 73±54.1 ay olan klinikte akut barsak amebiyazisi düşünülüp, dışkı örneklerinde Entamoeba histolytica(E. histolytica) kisti ve/veya trofozoiti saptanan 76 amebik gastroenteritli ve dışkı incelemelerinde E. histolytica ve diğer parazitlere rastlanmayan 29 non-parazitik gastroenteritli hastalardan alınan toplam 105 serum örneği ile kontrol grubu olarak seçilen 35 sağlıklı çocuğun serum örneğinde ELISA yöntemiyle E.histolyticaya karşı oluşan IgG sınıfı antikoru arandı. Ayrıca, direkt serum fizyolojik (SF) yöntemiyle yapılan dışkı mikroskobisine göre amebik gastroenterit tanısı konan 76 çocuk hastadan 42sinde ve sağlıklı grubu oluşturan 35 çocuktan 10unda IFA yöntemiyle anti-amebik IgM antikor varlığı incelendi. Bulgular: Dışkısında E.histolytica kisti ve/veya trofozoiti saptanan 76 hasta çocuğun 11inde (%14.4), ELISA yöntemiyle anti-amebik IgG antikoru pozitif bulunurken, non-parazitik gastroenteritli 29 hasta çocuğun tümü seronegatifdi. Kontrol grubunda ise 35 çocuktan birinde (%2.8) amip IgG antikoru seropozitif bulundu. Serum örneklerinin IFA ile incelenmesi sonucunda dışkı mikroskobisine göre amebik gastroenterit tanısı konan 42 hasta çocuğun 22sinde (%52.3), 10 sağlıklı çocuğun ise üçünde (%30) 1/8 sulandırımda amip IgM antikoru seropozitif saptandı. Çalışmaya alınan ve dışkı mikroskobisine göre amebik gastroenterit tanısı konulan olguların ELISA yöntemiyle anti-amebik IgG ortalama absorbans değerleri non-parazitik gastroenteritli ve sağlıklı grubun ortalama amip IgG absorbans değerlerinden daha yüksek olmak üzere sırasıyla 0.49±0.23, 0.28±0.23, 0.27±0.41 olup aradaki fark istatistiksel olarak anlamlıydı (p<0.05). Buna karşın, IFA yöntemiyle anti-amebik IgM antikor pozitifliği bakımından dışkı mikroskobisine göre amebik gastroenterit tanısı konulan grup ile kontrol grubu arasında anlamlı bir istatistiksel fark bulunamadı (p>0.05). Çalışmada, direkt SF yöntemiyle karşılaştırıldığında amip ELISA IgG testinin duyarlılığı %14.4, özgüllüğü %98.4, amip IFA IgM testinin duyarlılığı %52.3, özgüllüğü %71.4 olarak belirlendi. Sonuç: Klinik olarak barsak amebiyazisi düşünülen hastalardan alınan dışkı örneklerinin kolay, hızlı ve ucuz bir yöntem olan direkt SF yöntemi ile incelenmesinin yanında iyi bir şekilde standardize edilerek hazırlanan serolojik kitlerin kullanılmasının tanıyı destekleyebileceği düşünülmüştür. Ayrıca son zamanlarda geliştirilen patojenik amip suşlarına karşı hazırlanmış monoklonal antikorların kullanıldığı dışkıda direkt antijen arayan yöntemlerle oldukça duyarlı olan, patojen ve patojen olmayan türler arasında ayrım yapmayı sağlayabilen PCR gibi moleküler testlerin tanıda kullanılmasının yararlı olacağı kanısına varıldı.
Anahtar Kelimeler: Amebiyazis, Entamoeba histolytica, ELISA-IgG, IFA-IgM, Seroloji, Tanı
ABSTRACT
Purpose: The seroprevelance of the amebic gastroenteritis in children in our region and the use of the serological tests in the diagnosis of amebic gastroenteritis were investigated. Material and Methods: In this study the presence of IgG antibodies for E.histolytica was investigated by ELISA in a total of 105 patients with acute gastroenteritis. Out of 105 people that were screened, 76 were diagnosed as acute amebic gastroenteritis by the presence of amebic cystes or trofozoites in their stools. The stool examination of the remaining 29 patients were negative for E.histolytica as well as other parasites. The presence of IgG class of antibodies for E.histolytica were also investigated in the serum of 35 healthy children whose stool examination showed E.histolytica- cystes or trofozoites. The presence of anti-amebic IgM antibody was also investigated in 42 of 76 patients with gastroenteritis and in 10 of the 35 healthy children, concomitantly. Results: In 11 of the 76 (14.4%) patients with amebic gastroenteritis, anti-amebic IgG antibodies were detected with ELISA, all of the 29 patients in the non-parasitic group were found to be seronegative. Meanwhile, among the 35 healthy children, only one (2.8%) child was seropositive for the IgG antibodies of E.histolytica. The mean levels of the IgG absorbance of patients with amebic gastroenteritis patients with gastroenteritis of non-amebic nature, and the controls were 0.490±0.23, 0.280±0.23, 0.270±0.41, respectively (p<0.05). At the same time, the percentages for anti-amebic IgM antibodies were found to be 52.3% and 30% in the patients with amebic gastroenteritis and controls, respectively. No significant statistical difference between these two groups were found (p>0.05). In this study, the specificities and the sensitivities of the amebic ELISA IgG and IFA IgMConclusion: It can be drawn that the sensitive tests such as amebic IFA IgM and specificity tests such as amebic ELISA IgG, may be useful in the diagnosis of amebic gastroenteritis next to the conventional direct microscopic examination of the stool. But it should also be added that the specifity and the sensitivity of these tests can be increased by the standartization of the test procedures and with the purification of the antigen used in the tests. Also, we believe that zymodem ascertaining, the use of PCR and monoclonal antibodies in the identification of E.histolytica will decrease the failure of morfological diagnosis and answer the unknowns in therapy.
Keywords: Amoebiasis, Entamoeba hystolitica, ELISA-IgG, IFA-IgM, Serological Tests, Diagnosis
Purpose: The seroprevelance of the amebic gastroenteritis in children in our region and the use of the serological tests in the diagnosis of amebic gastroenteritis were investigated. Material and Methods: In this study the presence of IgG antibodies for E.histolytica was investigated by ELISA in a total of 105 patients with acute gastroenteritis. Out of 105 people that were screened, 76 were diagnosed as acute amebic gastroenteritis by the presence of amebic cystes or trofozoites in their stools. The stool examination of the remaining 29 patients were negative for E.histolytica as well as other parasites. The presence of IgG class of antibodies for E.histolytica were also investigated in the serum of 35 healthy children whose stool examination showed E.histolytica- cystes or trofozoites. The presence of anti-amebic IgM antibody was also investigated in 42 of 76 patients with gastroenteritis and in 10 of the 35 healthy children, concomitantly. Results: In 11 of the 76 (14.4%) patients with amebic gastroenteritis, anti-amebic IgG antibodies were detected with ELISA, all of the 29 patients in the non-parasitic group were found to be seronegative. Meanwhile, among the 35 healthy children, only one (2.8%) child was seropositive for the IgG antibodies of E.histolytica. The mean levels of the IgG absorbance of patients with amebic gastroenteritis patients with gastroenteritis of non-amebic nature, and the controls were 0.490±0.23, 0.280±0.23, 0.270±0.41, respectively (p<0.05). At the same time, the percentages for anti-amebic IgM antibodies were found to be 52.3% and 30% in the patients with amebic gastroenteritis and controls, respectively. No significant statistical difference between these two groups were found (p>0.05). In this study, the specificities and the sensitivities of the amebic ELISA IgG and IFA IgMConclusion: It can be drawn that the sensitive tests such as amebic IFA IgM and specificity tests such as amebic ELISA IgG, may be useful in the diagnosis of amebic gastroenteritis next to the conventional direct microscopic examination of the stool. But it should also be added that the specifity and the sensitivity of these tests can be increased by the standartization of the test procedures and with the purification of the antigen used in the tests. Also, we believe that zymodem ascertaining, the use of PCR and monoclonal antibodies in the identification of E.histolytica will decrease the failure of morfological diagnosis and answer the unknowns in therapy.
Keywords: Amoebiasis, Entamoeba hystolitica, ELISA-IgG, IFA-IgM, Serological Tests, Diagnosis
.: Process List